Kako koristiti metodu vanjskog standarda u plinskoj hromatografiji? - Blog

Metoda eksternog standarda je široko korištena tehnika kvantitativne analize u plinskoj hromatografiji (GC). Kao dobavljač plinskih hromatografa, dobro sam upućen u principe i primjenu ove metode. U ovom blogu ću vas voditi kroz proces korištenja metode eksternog standarda u plinskoj hromatografiji, od pripreme uzorka do analize podataka.

Razumijevanje metode eksternog standarda

Metoda eksternog standarda zasniva se na principu da je površina vrha ili visina vrha spoja u hromatogramu proporcionalna njegovoj koncentraciji u uzorku. Za korištenje ove metode priprema se serija standardnih otopina sa poznatim koncentracijama ciljnog spoja. Ovi standardi se zatim ubrizgavaju u plinski hromatograf i mjere se odgovarajuće površine ili visine pikova. Kalibraciona kriva se konstruiše crtanjem površina ili visina vrhova u odnosu na poznate koncentracije etalona. Kada se kalibraciona kriva uspostavi, koncentracija ciljnog jedinjenja u nepoznatom uzorku može se odrediti merenjem njegove površine ili visine vrha i pozivanjem na kalibracionu krivulju.

Korak 1: Priprema uzorka i standarda

Odabir standardnih spojeva: Odaberite čista standardna jedinjenja koja su reprezentativna za ciljne analite. Čistoća standarda treba da bude što je moguće veća da bi se osigurali tačni rezultati. Na primjer, ako analizirate hlapljiva organska jedinjenja (VOC), možete dobiti VOC standarde visoke čistoće od pouzdanih dobavljača.
Priprema standardnih rješenja: Pripremite seriju standardnih otopina s različitim koncentracijama. To se može učiniti razrjeđivanjem matične otopine standardnog jedinjenja sa odgovarajućim rastvaračem. Na primjer, ako koristite nepolarno otapalo kao što je heksan, provjerite je li standardno jedinjenje rastvorljivo u njemu. Koncentracije standardnih rastvora treba da pokriju očekivani opseg koncentracija ciljnog jedinjenja u nepoznatim uzorcima.
Priprema uzorka: Proces pripreme uzorka ovisi o prirodi uzorka. Za tečne uzorke, mogu se direktno ubrizgati u plinski hromatograf nakon odgovarajućeg razrjeđivanja ako je potrebno. Za čvrste uzorke, možda će biti potrebno da se ekstrahuju odgovarajućim rastvaračem pre ubrizgavanja. Na primjer, ako analizirate uzorak tla na pesticide, možete ekstrahirati pesticide organskim rastvaračem poput acetona.

Korak 2: Podešavanje instrumenta

Odabir kolone: Odaberite odgovarajuću kolonu za odvajanje ciljnih jedinjenja. Kolona treba da ima dobru selektivnost i rezoluciju za analite od interesa. Na primjer, kapilarna kolona sa specifičnom stacionarnom fazom može se odabrati na osnovu polariteta ciljnih spojeva. Ako analizirate nepolarna jedinjenja, može biti prikladna nepolarna kolona poput DB - 1 ili HP - 5 kolone.
Carrier Gas: Odaberite odgovarajući gas nosač, kao što je helijum ili azot. Brzina protoka nosećeg plina treba biti optimizirana kako bi se osigurala dobra separacija i ponovljivost. Brzina protoka se može podesiti prema dimenzijama kolone i vrsti analita.
Program temperature: Podesite temperaturni program za gasni hromatograf. Početna temperatura, brzina kretanja i konačna temperatura treba da se optimizuju da bi se postiglo dobro odvajanje jedinjenja. Na primjer, za složenu mješavinu jedinjenja sa različitim tačkama ključanja, temperaturni gradijent se može koristiti za eluiranje jedinjenja u razumnom vremenu.

Korak 3: Ubacivanje standarda

Injection Volume: Odredite odgovarajući volumen ubrizgavanja za standarde. Volumen injekcije treba da bude konzistentan za sve injekcije kako bi se osigurali precizni rezultati. Uobičajeni volumen ubrizgavanja za plinsku hromatografiju je u rasponu od 0,1 - 10 μL.
Tehnika ubrizgavanja: Koristite odgovarajuću tehniku ubrizgavanja, kao što je podijeljena injekcija ili injekcija bez split-a. Split injekcija je pogodna za uzorke s visokim koncentracijama, dok je splitless injekcija prikladnija za uzorke s niskim koncentracijama.
Rukovanje standardima: Ubrizgajte svaku standardnu otopinu u plinski hromatograf i snimite hromatograme. Pobrinite se da svaki standard pokrenete najmanje tri puta kako biste osigurali ponovljivost. Izmjerite površine vrhova ili visine ciljnog spoja na svakom hromatogramu.

Korak 4: Izrada kalibracione krive

Analiza podataka: Koristite vršne površine ili visine etalona i njihove odgovarajuće poznate koncentracije za konstruiranje kalibracijske krivulje. Možete koristiti softver koji ste dobili uz plinski hromatograf ili drugi softver za analizu podataka za izvođenje linearne regresije. Kalibraciona kriva treba da ima dobar linearni odnos, obično sa koeficijentom korelacije (R²) blizu 1.
Jednačina kalibracione krive: Nakon što je kalibracijska kriva konstruirana, dobijte jednadžbu linije u obliku y = mx + b, gdje je y površina vrha ili visina, x je koncentracija, m je nagib, a b je presek.

Korak 5: Analiza nepoznatih uzoraka

Ubrizgavanje nepoznatih uzoraka: Ubrizgajte nepoznate uzorke u plinski hromatograf koristeći istu zapreminu i tehniku ubrizgavanja kao i za standarde.
Mjerenje vršnih površina ili visina: Izmjerite površine vrhova ili visine ciljnog jedinjenja u hromatogramima nepoznatih uzoraka.
Određivanje koncentracije: Koristite jednadžbu kalibracione krive da izračunate koncentraciju ciljnog jedinjenja u nepoznatim uzorcima. Zamijenite izmjerenu površinu vrha ili visinu u jednadžbu i riješite koncentraciju.

Korak 6: Kontrola kvaliteta

Ponovljivost: Da biste osigurali pouzdanost rezultata, izvodite uzorke kontrole kvaliteta u redovnim intervalima. Ovi uzorci treba da imaju poznate koncentracije i da se analiziraju na isti način kao i nepoznati uzorci. Rezultati uzoraka kontrole kvaliteta treba da budu u prihvatljivom opsegu.
Testovi oporavka: Izvršite testove oporavka dodavanjem poznatih količina ciljnog jedinjenja u uzorke. Izračunajte stopu oporavka, koja bi trebala biti blizu 100%. Ako je stopa oporavka izvan prihvatljivog raspona, može doći do problema s pripremom uzorka ili metodom analize.

Naši proizvodi za plinsku hromatografiju

Kao dobavljač plinskih hromatografa, nudimo širok asortimanOprema za hromatografijuda zadovolji vaše analitičke potrebe. NašGC - 06E plinski hromatografje instrument visokih performansi sa naprednim karakteristikama kao što su precizna kontrola temperature i detektori visoke osetljivosti. Pogodan je za razne primjene, uključujući analizu okoliša, sigurnost hrane i farmaceutsku analizu.

NašGC Analyzerje još jedan odličan proizvod koji daje precizne i pouzdane rezultate. Jednostavan je za rukovanje i održavanje, što ga čini popularnim izborom među korisnicima.

Kontaktirajte nas za kupovinu

Ako ste zainteresovani za naše proizvode za gasnu hromatografiju i želite da saznate više o tome kako da koristite eksternu standardnu metodu u kombinaciji sa našim instrumentima, ili ako imate bilo kakva druga pitanja u vezi analize gasne hromatografije, slobodno nas kontaktirajte radi konsultacije o kupovini. Naš tim stručnjaka spreman je da Vam pomogne u pronalaženju najprikladnijeg rješenja za Vaše analitičke potrebe.

2 (1) 2 (2)